Contexte Hypertension portale non cirrhotique La NCPH est une complication rare mais potentiellement mortelle chez les patients infectés par le virus de l’immunodéficience humaine VIH Des cas de NCPH ont été rapportés chez des personnes séronégatives à la suite d’un traitement par thiopurines contre la leucémie ou une maladie intestinale inflammatoire. Cependant, on ne sait pas pourquoi la NCPH ne se développe que chez un petit sous-groupe de patients traités par la didanosine. Une étude cas-témoins multicentrique a été menée pour étudier le rôle de la pharmacogénomique dans la NCPH chez les patients infectés par le VIH. avec une exposition antérieure à la didanosine Trois témoins ont été choisis pour chaque cas, ajustés pour le sexe, l’âge, les numérations CD, l’ARN-VIH plasmatique et les SNP au niveau des enzymes impliquées dans le métabolisme des purines inosine triphosphatase, nucléotidase cytosolique-II , purine nucleoside phosphorylase et xanthine oxydase a été réalisée en utilisant la technologie SNPlex microarrayResu Quatre-vingt individus ont été examinés. avec NCPH et témoins appariés Deux SNP sur le gène de la ‘- nucléotidase ont été associés à la NCPH: rs% CG / GG vs% CC; P = et rs% CC / CT vs% TT; P = SNPs à d’autres locus au gène de la xanthine oxydase ont également été associés à NCPH: rs% AA vs% CC / AC; P = et rs% AA vs% CC / AC; P = Il y avait un risque cumulatif de NCPH pour ces SNP:%,%,%,% et%, respectivement, pour,,,, ou tous les SNP P = Conclusions Les SNP des gènes ‘-nucléotidase et xanthine oxydase influencent le risque de NCPH chez les patients VIH traités avec la didanosine

Hypertension portale non cirrhotique, VIH, didanosine, pharmacogénomique, polymorphismes géniquesDes maladies associées à la thérapie antirétrovirale ont été largement rapportées, en particulier pour les médicaments largement métabolisés dans le foie, tels que certains analogues nucléosidiques ou inhibiteurs de la protéase Les analogues nucléosidiques sont classiquement associés au médicament. Plus récemment, des cas d’hypertension portale non cirrhotique idiopathique NCPH ont été rapportés chez des individus infectés par le VIH Ceci est une entité difficile définie par la présence d’hypertension portale. en l’absence d’insuffisance hépatique grave Même si la prévalence globale de cette affection est faible chez les patients VIH +, le risque de complications potentiellement mortelles, c’est-à-dire des saignements gastro-intestinaux, souligne l’importance d’un diagnostic précoce. ou encéphalopathie a est moins commun dans cette affection, dans laquelle la fonction hépatique est relativement bien préservée. Le mécanisme sous-jacent au développement de la NCPH dans le VIH reste largement inconnu; cependant, une exposition antérieure à la didanosine a été reconnue comme facteur prédisposant dans la majorité des séries [,,,] De même, des cas de NCPH ont été rapportés chez des personnes séronégatives à la suite d’une exposition aux thiopurines, comme l’azathioprine, la mercaptopurine ou thioguanide, utilisé comme traitement des leucémies ou des maladies inflammatoires de l’intestin La biopsie du foie chez les patients VIH avec NCPH montre typiquement l’absence de cirrhose avec oblitération des veines porte distales dans une grande proportion des voies portales , avec ou sans caractéristiques d’hyperplasie nodulaire régénérative Alors que le parenchyme hépatique est minime, des signes d’hypertension portale sévère sont cliniquement manifestes, avec splénomégalie, varices œsophagiennes et, parfois, thrombose portale Nous émettons l’hypothèse que certains métabolites émergeant au cours du métabolisme de la didanosine pourraient endommager l’endothélium. vaisseaux porte-greffes De cette façon, les différences alléliques sur les gènes codant pour les enzymes impliquées dans le métabolisme de la didanosine, soit Ici, nous avons examiné l’influence des SNP polymorphismes mononucléotidiques sur les gènes impliqués dans la voie métabolique des purines sur le développement de la NCPH chez les patients infectés par le VIH ayant déjà été exposés à la didanosine.

PATIENTS ET MÉTHODES

Il s’agissait d’une étude cas-témoins prospective, multicentrique et internationale qui examinait les SNP potentiellement associés au développement de la NCPH chez les personnes infectées par le VIH. La population étudiée a été identifiée dans plusieurs cliniques VIH appartenant au European AIDS Trials Network NEAT, une initiative financée. Les critères d’admission à l’étude exigeaient une positivité pour l’infection par le VIH, une exposition préalable à la didanosine, aucune cirrhose et l’absence de cause identifiable de maladie hépatique, y compris l’hépatite B ou C, l’abus d’alcool, l’utilisation de médicaments hépatotoxiques et l’auto-immunité. Hémochromatose, maladie de Wilson, coagulopathies Les patients ont été divisés en groupes de cas et de contrôle, avec une: affectation Les sujets étaient des sujets ayant développé une NCPH, alors que les témoins étaient des individus exposés de la même manière à la didanosine sans développer de NCPH. , -, ou & gt; mois, âge, sexe, nombre de CD & lt ;, -, ou & gt; cellules / μL, et ARN-VIH plasmatique détectable vs indétectable; L’étude a été financée par NEAT et le protocole a été approuvé par le comité d’éthique de chaque centre participant. L’ADN génomique a été isolé à partir de cellules mononucléaires du sang périphérique en utilisant le kit QIAamp DNA Blood Maxi Qiagen, Hilden, Allemagne. recommandations du fabricant Des échantillons d’ADN ont ensuite été stockés pour chaque cas et témoins et expédiés à Madrid, en Espagne, où tous les échantillons ont été conservés congelés jusqu’au moment de l’étude Les examens génétiques ont été choisis pour les enzymes impliquées dans le métabolisme des purines physiologiques. Les SNP ont été testés comme suit: à l’inosine triphosphatase ITPA, à la nucléotidase, à la purine nucléoside phosphorylase, à la xanthine oxydase ou à la xanthine déshydrogénase. Toutes ces positions ont été sélectionnées à l’aide des ressources fournies par la Projet HapMap wwwhapmaporg

Figure Vue largeDownload slideSchéma de la voie métabolique purine Enzymes impliquées dans les étapes critiquesFigure View largeDownload slideSchéma de la voie métabolique purine Enzymes impliquées dans les étapes critiquesDes tests génétiques supplémentaires avec la caractérisation de variants alléliques ont été réalisés en utilisant la technologie SNPlex microarrays La discrimination allélique a été réalisée en utilisant un ADN xl d’Applied Biosystems Le logiciel Pedcheck d’Analyzer et GeneMapper a été utilisé pour détecter les incohérences mendéliennes

Analyses statistiques

Les principales caractéristiques de la population étudiée et la distribution des variants alléliques sont rapportées en valeurs absolues et en pourcentages. Les comparaisons entre les SNP ont été testées en utilisant le test All Tous les résultats sont exprimés en nombres absolus et en pourcentages. Des tests pour des comparaisons multiples ont été appliqués en suivant les principes rapportés ailleurs pour les études génomiques Toutes les analyses statistiques ont été effectuées en utilisant SPSS version SPSS Inc, North Chicago, Illinois

RÉSULTATS

Huit témoins ont été exclus rétrospectivement car ils ne correspondaient pas bien n = et / ou ne répondaient pas aux critères d’entrée n = Limiter le biais, la présence de témoins au moins appariés pour chaque cas de NCPH a ensuite été vérifié Parmi les individus finaux examinés,% étaient des hommes, avec un âge médian interquartile ans [IQR], -; % étaient de race blanche, et l’exposition médiane à la didanosine était de mois IQR, – Aucune différence significative n’a été trouvée en comparant la NCPH et les contrôles hormis le nombre de CD, qui était une conséquence directe de l’hypertension portale et de l’hypersplénisme dans le tableau précédent. Les antirétroviraux autres que la didanosine étaient similaires dans les cas et chez les témoins. Les patients ne prenaient pas de façon chronique tout autre médicament pertinent qui aurait pu amplifier l’effet de la didanosine ou agir comme le sien.

Tableau Caractéristiques démographiques principales et caractéristiques cliniques de l’étude Cas de population n = témoins n = P Valeur Âge moyen, y ± ± Sexe masculin, non% Durée moyenne de l’infection par le VIH, y ± ± Nombre moyen de CD, cellules / μL ± ± & lt; Pourcentage moyen de CD ± ± Nombre d’individus ayant un ARN du VIH plasmatique & lt; copies / mL,% Durée moyenne de l’exposition ddI, mo ± ± Cas n = témoins n = P Valeur Âge moyen, y ± ± Sexe masculin, Non% Durée moyenne de l’infection par le VIH, y ± ± Nombre moyen de CD, cellules / μL ± ± & lt; Pourcentage moyen de CD ± ± Nombre de personnes ayant un ARN du VIH plasmatique & lt; copies / mL,% Durée moyenne de l’exposition ddI, mo ± ± Les données statistiquement significatives sont présentées en italique. Abréviations: ddI, didanosine; La prévalence des SNP ne différait significativement à aucune position lorsqu’on compare nos témoins et les populations européennes de HapMap En revanche, les SNP étaient significativement surreprésentés dans les cas de NCPH comparés aux témoins. le gène ‘-nucléotidase était associé à NCPH:% de patients avec rsCG / GG vs% avec CC P = et% de patients avec rsCC / CT vs% avec TT P = Un autre allèle situé sur le gène de la xanthine oxydase était également associé à NCPH :% de patients avec rsAA vs% avec CC / AC P = et encore% de patients avec rsAA comparé à% avec CC / AC P = Figure résume ces résultats

Figure Vue largeDownload slideAssociation de polymorphismes mononucléotidiques chez des gènes impliqués dans le métabolisme des purines avec hypertension portale non cirrhotique chez des individus infectés par le virus de l’immunodéficience humaine Abréviation: NCPH, hypertension portale non cirrhotiqueFigure Voir grandDownload slideAssociation de polymorphismes mononucléotidiques sur des gènes impliqués dans le métabolisme des purines avec Hypertension portale non cirrhotique chez les individus infectés par le virus de l’immunodéficience humaine Abréviation: NCPH, hypertension portale non cirrhotiqueLa fréquence des variants alléliques minoritaires chez les blancs au niveau des SNP ayant une influence sur le risque de NCPH était la suivante: rs =, rs =, rs =, et rs = Fait intéressant, comme le montre la figure, il y avait un risque cumulatif de NCPH dans la population étudiée considérant la présence des SNP:%,%,%,% et%, respectivement, pour aucun,,, ou tous les SNP P = Comme prévu, la prévalence isolée et cumulative des SNP associés à la NCPH était généralement plus élevée. n cas comparés aux contrôles Tableau supplémentaire

Figure Vue largeDownload slide Risque cumulatif d’hypertension portale non cirrhotique chez les patients infectés par le virus de l’immunodéficience humaine avec des variants alléliques chez les loci sur les gènes codant pour les enzymes impliquées dans le métabolisme des purines Abréviations: NCPH, hypertension portale non cirrhotique; SNP, polymorphismes mononucléotidiquesFigure Voir en grand formatDisque cumulatif de l’hypertension portale non cirrhotique chez les patients infectés par le virus de l’immunodéficience humaine présentant des variants alléliques chez les loci codant pour des enzymes impliquées dans le métabolisme des purines Abréviations: NCPH, hypertension portale non cirrhotique; SNP, polymorphismes mononucléotidiques

DISCUSSION

Ces patients infectés par le VIH et atteints de NCPH peuvent subir soudainement des hémorragies gastro-intestinales massives à la suite de saignements oesophagiens avec ou sans thrombose portale. out, alors que les biopsies hépatiques montrent une lésion distinctive caractérisée par l’absence massive de veines porte avec oblitération fibreuse focale de petites veines porte Une exposition préalable à la didanosine a été reconnue comme un facteur prédisposant pour le développement de cette condition [,,,] Bien NCPH dans le contexte du VIH peut résulter d’étiologies similaires à celles de la population générale, sa fréquence accrue soutient que des facteurs uniques surviennent plus fréquemment dans la population VIH Des cas de NCPH ont été rapportés chez des personnes séronégatives à la suite d’une exposition à des agents chimiothérapeutiques, principalement des analogues de la purine, par exemple l’azathioprine, la mercaptopurine ou la thiogua D’autre part, la didanosine, qui est également un analogue de la purine, s’est révélée associée à un risque cardiovasculaire accru chez les patients infectés par le VIH . Ce médicament antirétroviral peut causer des dommages endothéliaux systémiques dans des mécanismes encore peu clairs, Bien que la plupart des rapports aient associé l’exposition à la didanosine au développement de la NCPH, la prévalence de la maladie est très faible par rapport à la Nous évaluons rigoureusement la prédisposition génétique au risque de développer la NCPH chez les personnes infectées par le VIH, ce qui constitue une nouvelle contribution au domaine. Les patients porteurs d’une carence en thiopurine méthyltransférase sujettes à une incidence plus élevée d’azathioprine ou de mycélosuppine De même, le déficit en ITPA, récemment avancé comme une protection contre l’anémie hémolytique induite par la ribavirine , peut également conduire à un risque accru d’analogue de la purine. Comme le montre la figure, les polymorphismes génétiques affectant l’expression et / ou la fonction d’autres enzymes critiques dans la voie métabolique des purines, à savoir la nucléotidase, la purine nucléoside phosphorylase ou la xanthine oxydase, pourraient aussi contribuer à la prédiction de ces complications. augmenter la toxicité de la didanosine ou de ses métabolites sur les vaisseaux porte-greffes une fois que le médicament oral est absorbé dans l’intestin et se déverse dans la circulation portale. Il convient de noter que la venopathie portale obstructive caractéristique identifiée chez les patients infectés par le VIH lésions hépatiques résultant d’autres conditions Dans cette situation, sa Étant donné que l’abus d’alcool, la stéatose hépatique et surtout l’hépatite C chronique affectent une proportion substantielle de la population VIH, la NCPH devrait être suspectée lorsque des signes cliniques, de laboratoire, échographiques et endoscopiques d’hypertension portale sévère apparaissent chez des patients. À cet égard, l’élastométrie transitoire peut être particulièrement utile pour exclure une fibrose hépatique avancée. La pertinence de nos résultats doit être interprétée avec prudence. D’abord, la didanosine est largement abandonnée et n’est plus recommandée en première intention. antirétroviral pour d’autres raisons, principalement un risque accru de toxicité mitochondriale Par conséquent, contrairement à la réaction d’hypersensibilité à l’abacavir, largement prédite par un seul marqueur génétique HLA-B *, l’implication clinique de nos résultats est limitée par l’élimination progressive de la didanosine de l’arsenal thérapeutique du VIH Ainsi, des tests génétiques de base de la xanthine oxydase Les SNP nucléotidases n’iront pas avant que la didanosine ne soit prescrite Une deuxième note de prudence découle des difficultés inhérentes à lier les traits génétiques aux maladies , et par conséquent, nos résultats doivent être validés dans un ensemble différent de patients, y compris non européens. En résumé, ceci est parmi les premières études rapportant des déterminants génétiques de NCPH idiopathique chez les individus infectés par le VIH. Nous avons trouvé des SNP sur les gènes nucléotidase et xanthine oxydase qui influencent significativement le risque de NCPH chez les patients infectés par le VIH avec une exposition préalable à la didanosine. des dommages endothéliaux aux vaisseaux portaux causés par des taux accrus de métabolites puriques de didanosine dans la circulation portale chez des sujets ayant des variants alléliques sensibles pourraient contribuer à cette complication. Nous ne pouvons exclure que d’autres SNP puissent également déterminer le risque de NCPH dans la population VIH. Des études d’association à l’échelle mondiale sur des populations plus importantes pourraient aider à répondre à cette question. question

Remarques

Remerciements Nous remercions Judit Morello et Elena Alvarez pour leur aide précieuse dans la collecte d’échantillons et l’analyse des données. Nous remercions également le Dr Pablo Lapunzina de l’Institut de Génétique Médicale et Moléculaire pour ses discussions et ses commentaires utiles. Ce travail a été financé en partie par le Réseau européen des essais du SIDA, le projet Red de Investigacion en SIDA RD, et la Fundacion Investigacion y Educaciôn en SIDAPcontrat d’intérêts potentiels Tous les auteurs: Aucun conflit signaléTous les auteurs ont soumis le Formulaire ICMJE pour la divulgation des Conflits d’intérêts potentiels Conflits que les éditeurs considèrent pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués